来源:浙江大学生物学国家级实验教学示范中心
时间:2023-03-23 18:43:32
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【实验目的】
了解诱导外源基因表达的基本原理,学习和掌握诱导外源基因表达的方法。诱导外源基因在宿主菌中高效表达,以提高目的蛋白的产量和质量,为SDS-PAGE分析做准备。
【实验材料】
表达型阳性克隆转化子;
【试剂与器材】
卡那霉素抗生素(Kan):母液50mg/ml,工作浓度50ug/ml;
IPTG:100mmol/L,工作浓度为0.3-1mol/L;
LB液体培养基:1%蛋白胨,0.5%酵母提取物,1%NaCl,用NaOH调pH到7.2,121℃灭菌20min备用。
恒温摇床;金属自动恒温加热器;微量移液器;超净工作台;常温离心机;冰箱;
【实验思考题】
1.简述诱导外源基因表达的基本原理。
2.如何确保外源基因在宿主中正常表达?