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DNA片段的体外连接

来源:浙江大学生物学国家级实验教学示范中心

时间:2023-03-23 18:54:30

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实验目的】

  利用T4DNA连接酶,在体外对不同生物DNA片段进行连接,以构建新的DNA分子,得到带有目的基因的质粒,用于转化实验。
【实验材料】

  酶切后的基因DNA片段与载体DNA片段;

【试剂与器材】

  T4DNA连接酶;10×连接缓冲液。

  恒温冷冻循环仪;超净工作台;微量移液器;冷冻离心机;冰箱;制冰机

 【实验思考题】

  1.进行DNA连接的反应温度为什么采用16?

  2.不同限制酶处理的DNA片段之间可以进行连接吗?为什么?