课程名称：分子杂交技术

　　学分：3

　　周学时：5.0

　　预修课程：生物化学，分子生物学，微生物学
　　面向专业：生物技术、生物科学、生物信息等专业

一、教学目的和基本要求

　　随着分子生物学的迅速发展，分子杂交技术已被广泛地应用于分子生物学各领域，如克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。分子杂交已成为分子生物学中不可或缺的研究工具。本课程针对授课对象的专业背景，详细介绍了分子杂交的基本概念和各种常见分子杂交技术的原理和实验技能。整个教学内容分为五章，分别介绍核酸分子杂交的基本概念；核酸探针的制备、标记；各种固相杂交技术，如Southern，Northern，菌落杂交，噬菌斑杂交；原位杂交和液相杂交的基本原理和方法以及蛋白质杂交Western blotting等。本课程旨在帮助学生了解和掌握分子杂交的基本概念和基本实验技能，为今后从事相关领域的研究和工作打下扎实的基础。

二、相关教学环节安排

　　理论教学和实验教学相结合，以实验教学为主，理论教学为辅。

三、主要内容及学时分配

　　共80学时

第一章　概述　2学时

第二章　核酸探针及其标记　13学时

　　　 1.核酸探针的种类      

　　　 2.核酸探针的标记

第三章　菌落杂交、噬菌斑杂交和斑点杂交 　20学时

       1.文库扩增

       2.噬菌斑/菌落转移

       3.探针杂交

       4.杂交结果检测

第四章　Northern blotting　20学时

　　　 1.样品RNA的抽提

　　　 2.样品RNA的处理

          3样品RNA的琼脂糖凝胶电泳

　　　 4.RNA的转移

          5.探针杂交

          6.杂交结果的检测

第五章　Western blotting　10学时

　　　 1.蛋白样品处理

　　　 2.蛋白样品电泳

　　　 3.蛋白样品转移

　　　 4.抗体杂交及杂交结果检测

第六章 EMSA 15学时

     1.蛋白样品纯化

     2.蛋白-DNA孵育、电泳

     3.样品转移

     4.探针杂交及检测