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细胞生物学及实...

实验二 密度梯度离心法分离提纯叶绿体及叶绿体荧光观察

来源：浙江大学生物学国家级实验教学示范中心

时间：2023-04-13 14:23:48

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一、实验目的
        学习密度梯度法，分离提纯菠菜叶绿体及叶绿体的荧光显微镜观察。
二、实验用品
材料：新鲜菠菜叶
器材：光学显微镜、台式高速冷冻离心机，研钵、剪刀、托盘、玻皿等
试剂： （1）匀浆介质（0.25 mol/L蔗糖、0.05 mol/L Tris-HCI缓冲液，pH7.4）（2）50%蔗糖溶液，（3）15%蔗糖溶液。
三、实验内容
1.取菠菜叶，剪碎置研钵中，加入匀浆介质研磨成糜状。
2.用双层纱布过滤捣碎液到烧杯中。
3.将滤液倒于离心管内,低速离心取上清液。
4.制备蔗糖密度梯度
5.加入上清液后,高速离心.
6.制片观察.
7.另取部分溶液在暗室内用荧光显微镜直接观察
四、作业
1 分离的叶绿体是否纯净？试分析原因。
2  实验报告