【实验目的】

1．学习测定反射时的方法，了解反射弧的组成。

2．观察中枢抑制与交互抑制现象。

3. 了解脊髓反射的功能特性。

【实验动物与器材】

蟾蜍或蛙、常用手术器械、生理信号采集系统、张力传感器、支架、蛙嘴夹、蛙板、蛙腿夹、小烧杯、小玻璃皿(2个)、小滤纸片、棉花、秒表、纱布、0.5％及1％硫酸溶液、2％普鲁卡因、烘干的浸盐滤纸片、任氏液。

【实验方法与步骤】

一、反射时和反射弧的测定

1. 取一只蟾蜍(或蛙)，只毁脑称脊蟾蜍(或脊蛙)，腹位固定于蛙板上。剪开右侧股部皮肤，分离出坐骨神经穿线备用。

2. 取下蛙腿夹，用蛙嘴夹夹住脊蟾蜍下颌，悬挂于支架上。将蟾蜍右后肢的最长趾浸入0.5％硫酸溶液中2～3mm(浸入时间最长不超过l0s)，立即记下时间(以秒计算)。当出现屈反射时，则停止计时，此为屈反射时。立即用清水冲洗受刺激的皮肤并用纱布擦干。重复测定屈反射时3次，求出均值作为右后肢最长趾的反射时。用同样方法测定左后肢最长趾的反射时。

3. 用手术剪自右后肢最长趾基部环切皮肤，然后再用手术镊剥净长趾上的皮肤。用硫酸刺激去皮的长趾，记录结果。

4. 改换右后肢有皮肤的趾，将其浸入硫酸溶液中，测定反射时，记录结果。

5. 取一浸有1％硫酸溶液的滤纸片，贴于蟾蜍右侧背部或腹部，记录擦或抓反射的反射时。

6. 用一细棉条包住分离出的坐骨神经，在细棉条上滴几滴2％普鲁卡因溶液后，每隔2min重复步骤4(记录加药时间)。

7. 当屈反射刚刚不能出现时(记录时间)，立即重复步骤（5）。每隔2min重复一次步骤（5），直到擦或抓反射不再出现为止(记录时间)。记录加药至屈反射消失的时间及加药至擦或抓反射消失的时间，并记录反射时的变化。

8. 将左侧后肢最长趾再次浸入0.5％硫酸溶液中(条件不变)，记录反射时有无变化。毁坏脊髓后再重复实验，记录结果。

二、脊髓反射抑制

1. 中枢抑制（谢切诺夫抑制）

（1）另取一只蛙用纱布包住，沿头部中线纵向切开并剪去颅顶皮肤，用剪刀自鼻孔向后小心打开颅骨，去掉脑膜，暴露脑组织。仔细观察脑各部位。

（2）用手术刀在间脑处作一横切，然后将动物挂在支架上。用干净滤纸片吸干脑断面上的液体。

（3）待动物安定后，用硫酸刺激一侧后肢，测定3次屈反射时。

（4）取一片烘干的浸盐滤纸片放在视叶断面上，立即按步骤（3）测定曲反射时，观察并记录反射时的变化。待反射时明显延长后，移去浸盐滤纸片，用任氏液冲洗断面，再测定反射时，观察抑制是否解除。

2. 脊髓反射的外周抑制

（1）用0.5%硫酸刺激一侧后肢，并测定其反射时。

（2）再用0.5%硫酸刺激一侧后肢，与此同时用镊子夹另一侧后肢的趾尖，观察硫酸刺激引起的屈反射有何变化。

（3）松开镊子，再观察受到硫酸刺激的后肢有何反应。

3. 交互抑制

（1）将动物放下，在一侧后肢膝关节处作环行切口，剥去小腿皮肤。

（2）分别结扎并剪断胫前肌在足背上的两附着点之肌腱，提起肌腱将胫前肌游离。

（3）结扎并剪断小腿后部的腓肠肌肌腱，游离腓肠肌。

（4）固定动物膝关节和髋关节，将胫前肌和腓肠肌肌腱结扎线分别连接在2支张力传感器上（注意调整松紧度）。

（5）用较强的连续脉冲刺激同侧背部皮肤，记录肌肉收缩曲线。可见腓肠肌收缩，胫前肌舒张。

【实验注意事项】

1．每次实验时，要使皮肤接触硫酸的面积不变，以保持相同的刺激强度。

2．刺激后要立即洗去硫酸，以免损伤皮肤。

3. 夹动物的后肢时，用力不能太大，以防损伤脚趾。 

【思考题】

1. 以实验结果为根据，以严密的逻辑推理方式说明反射弧的几个组成部分。

2. 分析颉抗肌交互抑制的原因及其意义。