【实验目的】

通过对无脊椎动物（蚯蚓）腹神经索的动作电位的“全或无”的观察，与已实验过的脊椎动物（蛙）的坐骨神经干的复合动作电位进行比较，加深对神经电生理学基本特性的进一步理解。

【实验原理】

绝大多数无脊椎动物腹神经索中的巨纤维是快速的传导途径。巨纤维参与无脊椎动物的惊觉反应（startle response），导致回缩性撤离受刺激的环境。一般认为，直径大的巨纤维对提高传导速度，加强快速的逃跑反应有特殊作用。

蚯蚓的腹神经索有3条巨纤维：在1条中巨纤维的两侧各有1条侧巨纤维。这些巨纤维传入感觉，并与运动神经元发生突触联系，使纵肌产生收缩。中巨纤维的直径约80µm,接受蚯蚓体表前1/3的感觉传入；侧巨纤维的直径约60µm，接受蚯蚓后部体表的感觉传入。解剖时，可拍击蚯蚓头部或尾部检查惊觉反应。

本实验通过测定蚯蚓巨纤维的动作电位，观测是单根神经纤维动作电位的“全或无”现象，比较进化地位不同动物神经冲动的传导速度和不应期。

【实验动物与材料】

解剖刀、剪刀、细镊子、玻璃分针，大头针、计算机、生物信号采集处理系统、神经屏蔽盒。生理盐液（由NaCl 7.0g、KCl 0.3g、CaCl₂ 0.1g、MgCl₂ 0.24g、Na₂SO₄ 0.34g、NaHCO₃ 0.14g加水至1000ml制成），10%乙醇溶液。

【实验方法与步骤】

1．标本制作 

取一条蚯蚓，放入10%的乙醇溶液中充分麻醉（约10min），用清水将蚯蚓清洗干净。将蚯蚓背面朝上放入蜡盘中，用大头针固定头尾，再用解剖刀从前向后沿背中线将体壁浅切开，并向两侧分开，用大头针固定于蜡盘上。

用镊子细心地将整个消化管、生殖器官和覆盖在神经索上的其它内脏器官全部去掉，用生理盐液冲洗干净，这样，蚯蚓的腹神经索即清晰可见。

在腹神经索的前1／3处，用玻璃分针将腹神经索向两侧发出的分支轻轻划断，用另一玻璃分针在此处穿过神经索将其挑起。再用同样的方法，向前、后分离出整个神经索，但要注意的是，愈向后端分离，神经索愈易拉断，必须十分小心。最后分离出咽下神经节。所分离的神经要尽可能长一点。标本制作以后，立即放入盛有生理盐液的培养皿中备用。

2.将生物信号采集处理系统、神经屏蔽盒连接好。

3.将神经标本的近头端放在刺激电极上，尾端放在引导电极上，标本与电极要保持接触良好。

4.打开生物信号采集处理系统软件。用示波器方式记录。固定刺激波宽（如0.2 mS），用自动幅度调节方式逐渐增大刺激强度。屏幕上首先出现刺激伪迹。当刺激强度达到某一值时（一般在0.2 V左右），伪迹后面突然出现一个动作电位。继续增大刺激强度，已出现的动作电位的振幅并不随刺激强度的增大而增大，而是在已出现的动作电位的后面，又出现第2个、第3个动作电位。这些相继出现的动作电位，同样不随刺激强度的增大而增大，即遵循着“全或无”定律。再分别取刺激波宽为0.5ms和2.0ms，测量蚯蚓腹神经索的中巨和侧巨纤维的阈强度。

5. 测量蚯蚓腹神经索的绝对不应期和相对不应期。

6. 测量蚯蚓腹神经索的动作电位的传导速度。比较中巨和侧巨纤维的动作电位。

【注意事项】

1.实验用蚯蚓要粗大，生命力要强。

2.制作标本要仔细，避免与金属接触。在分离较大的蚯蚓神经过程中，如靠近尾端断损，只要标本长度在6 cm以上，而且所保存下来的一段没有任何损伤也可以使用。

3.在整个实验过程中，既要防止神经干燥，又要避免过多的生理盐液存于电极间而造成短路。

【思考题】

比较蚯蚓腹神经索的动作电位与脊椎动物（蛙）的坐骨神经干的复合动作电位。