专利号：ZL 2012 1 0097502.1

证书号：第1326079号

申请日：2012.4.1

授权公告日：2013年12月25日

申请人：朱旭芬，张文武，吴敏

本发明公开了一种糖苷水解酶第18家属（GH18家属）——几丁质酶基因克隆的方法。发明利用单一碳源的特殊培养基筛选得到产几丁质酶的细菌，采用独特有效的半嵌套简并引物进行细菌GH18家属几丁质酶基因片段的扩增，然后利用sitefinding PCR方法或反向PCR方法获得全长的几丁质酶基因。然后构建几丁质酶基因的表达质粒，在大肠杆菌中进行基因的诱导表达。本发明的方法有效可靠，建立了一套行之有效的新型GH18家属几丁质基因克隆方法，为最终构建几丁质酶工程菌株，实现工业化生产几丁质酶奠定基础。

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